ПЦР - основа клонирования

diman | Просмотров: 663



Молекулярное клонирование-это невероятный процесс, который подтверждает жизненно важное значение для сельского хозяйства, медико-биологических исследований и экологических наук. Это хитроумный процесс, который называется Полимеразная цепная реакция (ПЦР), которая образует основу современной молекулярной методы клонирования. ". в высшей степени оригинальное и значительное, практически разделив биологии в двух эпохах, прежде чем П. С. Р. и после П. С. Р. "
― Нью-Йорк Таймс
(о работе Кэри Муллис)
Молекулярного клонирования используется, чтобы быть обременительным процессом, но благодаря ученым Кэри Муллис, в настоящее время исследователи используют метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) для создания копий изолированного Гена.

Он изобрел технику еще в 1983 году, и получил Нобелевскую премию за это в 1993 году. Однако истинная степень полезности техники только сейчас выходит на свет. Элегантно простой процесс традиционного клонирования и методов амплификации устарела.

Она существенно повлияла на ряд исследований молекулярной биологии, а также нашли ряд применений во многих областях, связанных с изучением или анализом образцов ДНК.

Что Он Делает
ПЦР-это процесс, посредством которого сегменты ДНК копируются получить миллиарды из одинаковых молекул. Это помогает в получении большого количества ДНК из крошечного образца, которые затем могут быть использованы для различных аналитических исследований. Ученые даже можете вставить эти копии в другие организмы. Введенного Гена (трансгена) будет встроен в геном клетки-хозяина, и черты характера, предоставляемых трансгенов выражаются хозяина.

Процесс
Сам процесс прост, но требует некоторых знаний. Ниже приведены основные шаги, участвующие в традиционном ПЦР.

1. Выбрать Свой Ген
Чтобы начать процесс, вы должны сначала выделить сегмент ДНК, который кодирует черты характера, которые вы ищете. Это включает в себя знания генома организма, и запас ферментов рестрикции, чтобы вырезать сегмент из молекулы. Есть много, много ферментов рестрикции, и все они признают и вырезать различные последовательности. Следовательно, нужно знать начальную и конечную последовательность сегмент, так что вы можете выбрать правильный фермент(ы).
2. Сделать суп
Как только вы имеете ваш сегмент ДНК, изолированные, ты бросала в крошечную пробирку, и добавить другие ингредиенты, необходимые для процесса. К ним относятся следующие:

(я) в буферный раствор используется для создания благоприятной среды для реакции произойти.

(II) и Праймеры подобраны специально, чтобы привязать к концу последовательности ДНК, которые вы хотите скопировать. Они служат в качестве основы, которая распространяется на создание новых копий.

(III) для taq полимеразы, термостабильный фермент, изолированный от водных бактерий, создает новые копии, используя праймеры в качестве шаблона.

(IV) в Deoxynucleoside трифосфаты являются основными структурными единицами молекул ДНК и служат в качестве сырья или строительных блоков для синтеза новых копий.

(V) для Одновалентных и двухвалентных катионов, таких как калий, магния, и марганца обеспечивает стабильность молекулы ДНК.
3. Добро пожаловать в машину
Как только все требования воедино, поместить трубку в аппарат под названием термоциклер. Эта машина пандусы температуру вверх и вниз на заданном уровне, через заранее определенные промежутки времени. Это происходит потому, что температура это то, что направляет действия всех этих различных ингредиентов и ферментов.

Во-первых, машина сохраняет высокую температуру, что заставляет двух нитей ДНК на отдельные. Затем он дает низкую температуру, чтобы позволить праймеры для привязки к любой стороне ДНК. Наконец, она является умеренной температуре на некоторое время, чтобы позволить taq полимеразы для путешествий вдоль пряди, придавая нуклеозида базы в порядке, определяемом прядь копируются.

В конце этого шага, вы, наконец, в полный рост точную копию вашего сегмент. Этот цикл повторяется снова снова и снова, в течение примерно 30 до 40 раз. Это приводит к экспоненциальной амплификации, порождая более миллиарда идентичные копии нужного сегмента ДНК.
ПЦР-это простой, но гениальный процесс для достижения быстрого усиления нужный сегмент ДНК. Различные варианты и модификации этого основного процесса было доказано, чтобы быть полезным инструментом в различных научных исследований, а также методами диагностики, анализа и поиска новых приложений каждый день.


Комментарии


Ваше имя:

Комментарий:

ответьте цифрой: дeвять + пять =



ПЦР - основа клонирования
ПЦР - основа клонирования